В 1998 году окончил Макеевский городской лицей. С 1999 года по 2000 год проходил службу в Национальной гвардии Украины.
Окончил Донбасскую национальную академию строительства и архитектуры (факультет «экономика предприятия»).
С 2011 года по 2013 год являлся функционером движения «МММ» (укр. Ми маємо мету), был волонтёром, а затем, когда на основе «МММ» была создана одноимённая партия, Пушилин стал её членом.
5 апреля 2014 года стал заместителем «народного губернатора» Донецкой области Павла Губарева, а затем возглавил митинг жителей Донецка.
После провозглашения Донецкой Народной Республики (ДНР), Пушилин входит в состав временного правительства ДНР.
15 мая был Пушилин занимает наивысшую должность в ДНР - Председателя президиума Верховного совета.
18 июля Пушилин ушёл в отставку: находясь в Москве, он отправил письмо с просьбой об уходе с занимаемой должности по собственному желанию вице-спикеру парламента Владимира Маковича. После отставки являлся координатором и сопредседателем «Народного фронта Новороссии».
В сентябре 2014 года объявил, что собирается участвовать в ноябрьских выборах главы и депутатов Верховного Совета ДНР. В октябре зарегистрировался как кандидат в депутаты Верховного Совета ДНР от общественного движения «Донецкая республика».
По итогам всеобщих выборов в ДНР 3 ноября 2014 года стал депутатом Народного Совета Донецкой Народной Республики от общественно-политического движения «Донецкая республика». 14 ноября избран заместителем председателя Народного Совета.
9 ноября Пушилин Указом Главы ДНР Александра Захарченко также назначен на должность Постоянного полномочного представителя республики на переговорах трехсторонней контактной группы в Минске.
2 мая 2014 года объявлен в розыск по ходатайству прокуратуры, в июне о розыске Пушилина также сообщила Служба безопасности Украины. Его подозревают в совершении действий с целью насильственного изменения или свержения конституционного строя или захвате государственной власти (ст. 109 ч. 1 Уголовного кодекса Украины).